En esta línea de investigación nos proponemos la selección in vitro, mediante enriquecimiento exponencial en presencia del ligando (SELEX), de moléculas de RNA o de DNA de cadena sencilla, aptámeros, que sean capaces de reconocer de forma específica y con alta afinidad otras moléculas, principalmente proteínas. Los aptámeros puede aprovecharse en un doble sentido: por una parte, son capaces de inhibir la actividad de las moléculas diana con las que interaccionan por lo que pueden ser usados para regular determinadas rutas en la célula y, por otro lado, los aptámeros han sido utilizados como herramientas capaces de reconocer su diana en el interior de la célula. En el laboratorio estamos seleccionando aptámeros frente a proteínas implicadas en apoptosis con el objetivo de interferir en la regulación de este proceso en distintas enfermedades neurodegenerativas. Para ello, se están utilizando diversas colecciones de oligonucleótidos con secuencias al azar de distintas longitudes flanqueadas por secuencias conocidas. Los oligonucleótidos que interaccionan con las moléculas dianas son amplificados por PCR y tras varias rondas de selección se procede a la secuenciación de los oligonucleótidos seleccionados. En una segunda fase, estos oligonucleótidos serán transfectados en células que sobreexpresen la proteína diana y se analizará la capacidad de los aptámeros de interferir en su efecto. Por último, se utilizarán estas moléculas en sistemas que mimeticen algunas enfermedades como isquemia o esclerosis múltiple en las que algunas células, y en determinadas condiciones, mueren por apoptosis.

Palabras clave: Aptámeros; apoptosis; Bcl-2; caspasas, estrés oxidativo; proteolisis; transducción de señales.

Técnicas empleadas (ver PDF)

Publicaciones representativas:

González V.M., Fuertes M.A., Alonso C. and Pérez J.M. (2001) Is Cisplatin-induced Cell Death Always Produced by Apoptosis?. Mol Pharmacol. 59(4):657-663

González V.M., Fuertes M.A., Perez-Alvarez M.J., Cervantes G., Moreno V., Alonso C. and Pérez J.M. (2000) Induction of Apoptosis by the bis-Pt(III) Complex [Pt2(2-mercaptopyrimidine) 4Cl2]. Biochem Pharmacol. 60(3):371-379

González V.M., del Peso L., Inohara N., Ellis R.E., and Núñez G. (2000) Disruption of the CED-9-CED-4 Complex by EGL-1 Is a Critical Step for Programmed Cell Death in Caenorhabditis elegans. J Biol Chem. 275(35):27205-27211

González V.M., Fuertes M.A., Jiménez-Ruiz A., Alonso C., and Pérez J.M. (1999) The Formation of DNA Interstrand Cross-Técnicass by a Novel Bis-[Pt2Cl4 (diminazene aceturate)2]Cl4.4H2O Complex Inhibits the B to Z Transition. Mol Pharmacol. 55(4):770-777